液質(zhì)聯(lián)用儀實現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補,將色譜對復雜樣品的高分離能力與質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度結(jié)合起來。在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
儀器污染是液質(zhì)聯(lián)用儀在日常工作中會遇到的常見問題。但只要做好預(yù)防工作,就可以有效降低液質(zhì)聯(lián)用儀出現(xiàn)污染問題的概率。本文將從溶劑處理、實驗器材清洗等方面介紹預(yù)防污染的措施。
1、請正確選擇、制備和處理溶劑:
有機溶劑必須為色譜純及以上級別,推薦使用進口品牌試劑。
注意:)有機溶劑請注意制造商建議的有效期,打開溶劑瓶可能會發(fā)生污染;2)水或緩沖鹽溶液要使用超純水(18.2 M?)。
水溶性流動相和水易受微生物生長的影響,可能會在梯度運行中形成峰,并在等度運行中增加背景吸收。為防止流動相中生長微生物,請每天制備且過濾含水流動相并進行脫氣。
為減少背景噪音,請使用Z低濃度的流動相添加劑。使用的添加劑越多,引入流動相的污染就會越多。
請使用色譜純級別以上的添加劑。同時,請使用含低濃度鐵離子和其他金屬離子的添加劑,例如:甲酸。請注意切勿使用可能含有大量金屬離子的乙酸。最后請注意,不可使用非揮發(fā)性的添加劑等。
溶劑應(yīng)儲存于潔凈的玻璃器皿中,并蓋上溶劑瓶以防止通過空氣傳播的污染物進入溶劑。封蓋溶劑瓶時,請使用鋁箔或者系統(tǒng)隨附的蓋子。
注意:請勿使用Parafilm或其他塑料薄膜覆蓋溶劑瓶。
2、請正確清洗實驗室玻璃器皿:
使用前必須徹底清洗用于制備或儲存流動相的玻璃器皿。切勿使用去污劑或洗潔精清洗玻璃器皿。請先用有機溶劑沖洗玻璃器皿,再用水沖洗。
如果需要進行更徹底的清洗,可按照以下步驟操作:
依次使用10%甲酸、純水、甲醇或乙腈進行超聲處理,最后再用水進行超聲處理;
再次重復此操作兩次;
將用于制備或儲存流動相的玻璃器皿與其他常用的玻璃器皿分開存放。
3、請正確制備和處理樣品:
請確保樣品無顆粒。同時,在制備和處理樣品的過程中必須注意不要引入污染。請使用潔凈的樣品瓶、瓶蓋和樣品板。推薦使用沃特世的進樣小瓶。
4、請佩戴手套:
請佩戴無顆粒物、無粉塵的非乳膠手套。如果手套變濕,應(yīng)予以更換。濕手套會帶入污染。
5、請使用潔凈的色譜柱:
UPLC或HPLC色譜柱可以捕獲色譜柱頭上的顆粒物、沉淀的蛋白質(zhì)以及其他有機污染物。這些污染物會增加操作壓力或改變色譜柱選擇性,從而對色譜柱的壽命產(chǎn)生不良影響。此外,污染物可能緩慢排出,使殘留和背景噪音增加。
色譜柱還會聚集溶劑中的雜質(zhì)。這種情況會在以下條件下發(fā)生:
使用含水量較高的溶劑對反相色譜柱(例如C18色譜柱)進行長時間平衡;
使用有機試劑濃度較低的溶劑在反相色譜柱上執(zhí)行等度運行。
吸收的化合物可能會洗脫為顯著的峰或成為延伸在整個色譜圖上的大寬峰。痕量成分的富集效果會增加溶劑或UPLC/HPLC系統(tǒng)中的污染物含量。
存儲色譜柱時,請在柱中使用最初提供的溶劑(例如100%乙腈)進行存儲。在存儲之前,沖洗色譜柱,以清除緩沖劑和添加劑。
注意:有關(guān)色譜柱的詳細保樣與使用說明,請參閱色譜柱制造商提供的保樣與使用說明。
6、檢查實驗室空氣:
請保持實驗室空氣潔凈。例如實驗室空氣中可能存在鄰苯二甲酸鹽。通過空氣傳播的鄰苯二甲酸鹽來源于空調(diào)濾清器,會污染與空氣接觸的任何溶劑或固體。